直播预告 | 打破速度枷锁！全身神经实现高效透明化全域成像

TESOS透明化样本具备优异机械切割性能，适配石蜡切片机逐层切削成像标准流程：结合40/1.3NA 油镜，设备单次可完成最高350μm深度组织三维成像，完成当前深度层拍摄后，借助课题组定制专用样本支架将样本精准复位固定，用石蜡切片机切除约300μm表层组织，重新放回显微镜下对深层组织继续成像，循环往复直至完成全样本的三维数据采集，最终通过软件拼接所有分层图像，重构完整三维图像重建。

在徕卡THUNDER系统投入使用前，课题组长期采用传统激光点扫描共聚焦开展分层拍摄，整套实验存在难以规避的致命短板：

点扫描依靠单点激光逐像素采集图像，面对TESOS厚透明样本逐层扫描时耗时极长。单批次样本需要数十轮“成像—切片—复染"循环，每层数百微米组织扫描动辄耗费数小时，整套样本完整成像往往需要数天乃至数周，大量科研人力、耗材被无效等待占用，大幅降低样本制备与数据产出通量。

转基因小鼠依靠红绿内源荧光标记神经纤维，点扫描长时间持续激光照射会造成严重光漂白，深层组织、纤细外周神经的荧光信号持续衰减，部分神经分支标记丢失，最终拼接的三维图谱出现断层，影响神经纤维走向、突触连接关系的精准观测。

点扫描为缩短时长常被迫下调采集分辨率，获取的图像像素、细节精度无法满足后期软件三维合成要求，分层图像拼接时出现错位、细节模糊，无法实现单细胞级神经结构可视化。

THUNDER Imager Cell Spinning Disk系统搭载15000转高速CrestOptics转盘与THUNDER图像加强技术，并行多点扫描模式从底层解决点扫描固有缺陷，契合TESOS逐层切片成像全流程需求：

转盘共聚焦依靠大量针孔进行成像，同一视野采集时间仅为传统点扫描系统的1/10。针对TESOS单次数百μm成像深度的分层采集需求，每层扫描时长从数小时缩短至数十分钟，单只完整小鼠全脑成像周期从一周压缩至48小时完成，批量样本处理能力显著提升，大幅释放课题组TESOS技术迭代、多组别对照实验的科研效率。

依托LVCC大体积图像加强技术，系统可实时剥离厚样本离焦模糊杂光，最高支持350μm深度无伪影光学切片，匹配TESOS单次成像深度标准。即便经过透明化固化的高密度小鼠躯体组织，深层脊柱、内脏、四肢外周神经的微弱内源荧光也能清晰分离，无需反复调整物镜、激光参数，每层成像一次即可获取完整多层光学切片数据。

并行多点扫描大幅降低单位区域激光照射剂量，光漂白、光毒性远低于单点扫描模式。在数十轮“成像-切片-复染"循环中，每层神经荧光信号强度稳定可控，不会出现深层结构标记丢失问题，保证前后分层图像荧光强度统一，为后期完整神经网络三维拼接提供标准化原始图像。

系统实测横向表观分辨率和像素精度匹配后期软件处理和三维重构的运算要求。分层图像拼接无细节丢失，可完整呈现大脑皮层神经元、背根神经节投射、四肢外周神经、全身神经网络的细微分支，支撑课题组直接观测神经纤维全身分布、走向与突触连接关系。

二者形成标准化闭环实验流程，打通大样本透明化从样本制备到全域三维重建全链路：

整套流程依托THUNDER的高速成像能力，解决了此前制约TESOS技术规模化应用的最大时效难题，加速颅颌面发育、外周神经损伤、神经环路连接等方向的基础研究产出。